بررسی سرولوژیکی و مولکولی ویروس پژمردگی لکه ای گوجه فرنگی (TSWV) در استان خراسان رضوی

نوع مقاله : مقالات پژوهشی

نویسندگان

چکیده

به منظور بررسی ویروس پژمردگی لکه ای گوجه فرنگی Tomato Spotted Wilt Virus(TSWV) در سال های زراعی 1387 و 1388 از مزارع استان خراسان رضوی ( شهرستان های مشهد، نیشابور، قوچان، کاشمر، تربت حیدریه، فریمان، رشتخوار، تخت جلگه ) تعداد 636 نمونه گوجه فرنگی جمع آوری شد. نمونه هایی که دارای علایم رنگ پریدگی، بافت مردگی و لکه های حلقوی بودند جمع شده و در شرایط خنک به آزمایشگاه انتقال داده شدند. در آزمایشگاه به منظور ارزیابی وجود ویروس در نمونه های مشکوک، آزمون سرولوژیکی TAS-ELISA انجام شد و نمونه های آلوده به ویروس که در آزمون الایزا مشخص شدند به 3 رقم توتون Nicotiana rustica ، Nicotiana clevelandii و Nicotiana tabacum var Samson مایه زنی گردیدند و پس از ظهور علائم با آزمون TAS-ELISA آزمایش شدند. در شناسایی مولکولی نمونه های آلوده به ویروس با استفاده از محلول (-plus)™RNX استخراج RNA صورت گرفت و با استفاده از آغازگر اختصاصی در واکنش RT-PCR قطعه ای در محدوده باندی bp276 تکثیر یافت. نتایج حاصل از آزمون TAS-ELISA و RT-PCR وجود ویروس را در مزارع گوجه فرنگی استان خراسان رضوی به اثبات رساند. در آزمون مایه زنی مکانیکی ویروس مورد مطالعه تنها در توتون Nicotiana tabacum var Samson ( تغییر شکل برگ ها و ابلقی ) علائم مشخص بیماری را نشان داد.

کلیدواژه‌ها


عنوان مقاله [English]

Serological and Molecular Detection of Tomato spotted wilt virus (TSWV) in Khorasan Razavi Province

نویسندگان [English]

  • S. Shoushtari
  • B Jafarpour
  • M. Falahaty Rastegar
چکیده [English]

In order to investigate the presence of Tomato spotted wilt virus ( TSWV) in tomato fields of Khorasan Razavi province ( Mashhad , Neishabour , Torbat-e-Hydarieh , Kashmar , Ghochan , Fariman , Takht-e-Golgeh and Roshtkhar ), totally 636 samples were collected from tomato fields in summer of 2008 and 2009 . The plant that showed symptoms of chlorotic , necrotic and ring spot were collected and transferred to the laboratory in cold condition , then tested by TAS-ELISA . Sap from infected plants inoculated to 3 cultivars of indicator plant e.g Nicotiana rustica, N . clevelandii and N. tabacum var Samsun . To confirme symptomology, inoculated indicator plants tested by TAS-ELISA. For molecular detection, RNA extracted by use of RNX TM(plus) kit . In RT-PCR , specific primer , amplified a fragment of 276 bp . Using RT-PCR and mechanical transmission tests , the presence of TSWV has been proven in tomato field of the province .In inoculating indicator plants only Nicotiana tabacum var Samsun (leaf deforming and mottling ) showed specific virus symptoms .

کلیدواژه‌ها [English]

  • Mechanical transmission
  • RT-PCR
  • Tomato spotted wilt virus
CAPTCHA Image